کروماتوگرافی ستون کلاسیک

کروماتوگرافی ستون کلاسیک، همچنین به عنوان کروماتوگرافی جامد مایع شناخته می شود ، یک تکنیک برای جدا کردن املاح بر اساس تفاوت در توزیع بین یک فاز ثابت (معمولاً یک جاذب جامد) و یک فاز متحرک (حلال).} اصل اساسی می تواند به شرح زیر باشد: با کمک مرحله ثابت ، محلول از محلول به طور جداگانه به عنوان آفریت می شود. ضرایب توزیع بین فاز ثابت و فاز موبایل.

در کروماتوگرافی ستون ، فاز ثابت معمولاً از ذرات متخلخل تشکیل شده است (مانند ژل سیلیس ، آلومینا ، کربن فعال ، و غیره .) که دارای یک سطح خاص و سطح جذب بزرگ و مرکز جذب است و می تواند پیوندهای هیدروژن را با مولکول های پرشور ، نیروهای ون در ویولز ایجاد کند ، و در نتیجه تداخلات} 1 مولکول ها از مرحله ثابت ، و انتخاب آن باید با توجه به قطبیت املاح و ویژگی های جذب جاذب. تعیین شود

در فرآیند جداسازی ، محلول مخلوط به ستون حاوی فاز ثابت . با جریان فاز موبایل وارد می شود ، اجزای سازنده با سرعت های مختلف به دلیل ظرفیت جذب مختلف فاز ثابت .}}}} معمولاً آسان تر است که به آرامی در مرحله قرار می گیرند ، بنابراین آنها به آرامی می توان با استفاده از آن به آرامی حرکت کرد ، بنابراین آنها به آرامی در مرحله قرار می گیرند. به راحتی توسط فاز موبایل دور می شود ، و سرعت حرکت سریعتر است. از این طریق ، هر یک از مؤلفه ها تعدادی از باند های رنگی را روی ستون تشکیل می دهند تا به جدایی برسند .

► هدف از درمان مشتق
هدف اصلی مشتق شدن تغییر خصوصیات فیزیکوشیمیایی آنالیت ها به طوری که آنها برای جداسازی و تشخیص توسط کروماتوگرافی ستون مناسب تر هستند . به طور خاص ، پردازش مشتق می تواند به اهداف زیر برسد:

1) عملکرد تشخیص بهبود یافته: با معرفی گروه های کاربردی که به راحتی قابل تشخیص هستند ، آنالیت سیگنال قوی تری بر روی ردیاب ایجاد می کند ، حساسیت و دقت تشخیص را بهبود می بخشد.
2) ساختار مولکولی یا قطبیت را تغییر دهید: قطبیت آنالیت را تنظیم کنید تا جداسازی آن در ستون بهبود یابد و اوج پیگیری و همپوشانی. را کاهش دهد
3) افزایش نوسانات: برای برخی از آنالیت های غیر فرار ، مشتق شدن می تواند نوسانات آنها را بهبود بخشد ، و باعث جدا شدن و تشخیص آنها در کروماتوگرافی گازی.}
4) آنالیت پایدار: گروههای عملکردی حساس در آنالیت می توانند توسط مشتق شدن محافظت شوند تا از تخریب یا تغییر در طول جداسازی و تشخیص.} محافظت کنند

► نوع درمان مشتق
مشتق شدن عمدتا به دو نوع تقسیم می شود: مشتق شدن قبل از ستون و مشتقات پس از ستون:

1) مشتق قبل از ستون:
قبل از ورود آنالیت به ستون ، از نظر شیمیایی با مشتقات واکنش نشان می دهد تا مشتقات . تولید کند
مشتقات سپس بر روی یک ستون . جدا شده و شناسایی می شوند
مشتقات پیش از کلون مزایای شرایط واکنش آزاد و واکنش چند مرحله ای آسان را دارد ، اما ممکن است ناخالصی ها را نیز معرفی کند یا نمونه های خود را از دست بدهد.
2) مشتق ستون:
آنالیت ها ابتدا بر روی ستون کروماتوگرافی از هم جدا می شوند و سپس با مشتقات موجود در سلول مشتقات . واکنش شیمیایی نشان می دهند
مشتقات حاصل سپس برای ردیاب . وارد ردیاب می شوند

اشتقاق پس از ستون مزایای تکرارپذیری خوب و عوامل تأثیرگذار کمتری دارد ، اما به ابزارها و تجهیزات اضافی نیاز دارد.
as نمونه های کاربردی از پردازش مشتق
در استخراج و جداسازی اجزای شیمیایی دارویی طبیعی ، همراه با فناوری پردازش مشتق می تواند به برنامه های زیر برسد:

1) حساسیت تشخیص بهبود یافته: به عنوان مثال ، در تجزیه و تحلیل اسید آمینه ، معرفی گروه های عملکردی به راحتی قابل تشخیص (مانند فلوروفورها) از طریق مشتقات قبل از ستون می تواند استحکام سیگنال اسیدهای آمینه را در ردیاب افزایش دهد ، در نتیجه حساسیت تشخیص را بهبود بخشد.}}}}}}}}}}}
2) اثر جداسازی را بهبود بخشید: برای برخی از ترکیبات با قطبیت مشابه یا ساختار مشابه ، قطبیت را می توان با درمان مشتق سازی تنظیم کرد ، به طوری که می توان اثر جداسازی بر روی ستون کروماتوگرافی بهبود یافت. به عنوان مثال ، در تجزیه و تحلیل فلاونوئیدها ، گروههای عملکردی متفاوت می توانند از طریق درمان مشتقات}} regeration {regration {regration} regeration} redgation} regeration} regration}} regration}} regration}} regration}} regration} {polarity}} regration.
3) محافظت از گروههای عملکردی حساس: برای آنالیت های حاوی گروههای عملکردی حساس (مانند هیدروکسیل فنلی ، آمینو ، و غیره.) ، مشتقات می تواند از تخریب یا تغییر در هنگام جداسازی و تشخیص محافظت کند {. به عنوان مثال ، در آنالیز کربوهیدرات ، در اثر تجزیه و تحلیل هیدروکسیل عملکردی می توان از نظر هیدروکسیل استفاده کرد. جدایی .