کروماتوگرافی ستون HPLC
2. ستون کروماتوگرافی (نوع چرخش)
3. ستون کروماتوگرافی (دستی)
*** لیست قیمت برای کل فوق ، از ما سؤال کنید که دریافت کنید
شرح
پارامترهای فنی
کروماتوگرافی ستون HPLC، همچنین به عنوان کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا) شناخته می شود ، یک کروماتوگرافی مایع ستونی با راندمان جدایی بالا است و همچنین شاخه مهمی از کروماتوگرافی است.
این اجزای موجود در نمونه را با توجه به تفاوت نیروی جذب و ضریب پارتیشن بین فاز ثابت و فاز متحرک جدا می کند. یک سیستم تزریق فشار قوی ، یک فاز متحرک (معمولاً یک حلال واحد یا مخلوطی از حلال ها با قطب های مختلف) در ستونی حاوی یک مرحله ثابت قرار می گیرد. هنگامی که هر مؤلفه در نمونه از ستون کروماتوگرام عبور می کند ، به دلیل اندازه و استحکام مختلف تعامل با فاز ثابت (مانند جذب ، توزیع ، محرومیت ، وابستگی) ، زمان اقامت در مرحله ثابت نیز متفاوت است ، به طوری که برای دستیابی به جداسازی هر مؤلفه. مؤلفه های جدا شده سپس برای شناسایی وارد ردیاب می شوند ، بنابراین اطلاعات کیفی و کمی از هر مؤلفه را بدست می آورند.
پارامتر
برنامه های کاربردی در تجزیه و تحلیل دارویی
استفاده از کروماتوگرافی ستون HPLC در تجزیه و تحلیل دارو
به عنوان یک فناوری مهم تجزیه و تحلیل جداسازی ، کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) از زمان توسعه سریع آن در دهه 1970 پتانسیل و ارزش کاربردی خوبی را در زمینه تجزیه و تحلیل دارویی نشان داده است. HPLC با ترکیب اصول جداسازی کروماتوگرافی مایع کلاسیک و کروماتوگرافی گازی ، به ابزاری ضروری در تجزیه و تحلیل دارو برای جداسازی کارآمد ، تجزیه و تحلیل سریع ، حساسیت تشخیص عالی و طیف گسترده ای از کاربردها تبدیل شده است.
اصول و خصوصیات اساسی
از تعامل فازهای ثابت و متحرک استفاده می کند تا به تدریج اجزای مختلف مخلوط را جدا کند. فاز ثابت می تواند یک جامد یا یک مایع متصل به یک جامد باشد ، در حالی که فاز متحرک یک مایع یا گاز است. در HPLC ، حلال از طریق ستون با فشارهای زیاد صدها جوی مجبور می شود و باعث افزایش کارایی جداسازی می شود. با توجه به مکانیسم جداسازی مختلف ، HPLC را می توان به HPLC فاز طبیعی ، HPLC فاز معکوس ، HPLC تبادل یون و محرومیت حجم HPLC تقسیم کرد. هر نوع از دامنه کاربرد خاص و مکانیسم جداسازی خود ، مانند HPLC فاز طبیعی برای جدا کردن آنالیت ها بر اساس قطبیت ، و HPLC فاز معکوس برای جدا کردن با استفاده از فعل و انفعالات آبگریز برخوردار است.
خصوصیات کروماتوگرافی ستون HPLC عمدتاً در جنبه های زیر منعکس می شود:
راندمان جدایی بالا: HPLC به لطف پمپ های تزریق فشار بالا و ستون های با کارایی بالا ، جداسازی کارآمد از مخلوط های پیچیده را امکان پذیر می کند.
حساسیت بالا: آشکارسازهای مدرن ، مانند آشکارسازهای جذب ماوراء بنفش ، آشکارسازهای فلورسانس ، آشکارسازهای طیف سنجی جرمی و غیره ، باعث می شوند HPLC دارای حساسیت تشخیصی بسیار بالایی باشد.
طیف گسترده ای از برنامه ها: HPLC با نوسانات و پایداری حرارتی نمونه محدود نمی شود و می تواند مواد فعال فیزیولوژیکی ناپایدار حرارتی را با نقطه جوش زیاد تجزیه و تحلیل کند و تبخیر آسان نیست.
درجه بالایی از اتوماسیون: بیشتر ابزارهای مدرن HPLC مجهز به نمونه گیری خودکار و پردازنده داده ها هستند که می توانند اتوماسیون تجزیه و تحلیل و پردازش سریع داده ها را تحقق بخشند.
 |
 |
 |
 |
کاربرد خاص در تجزیه و تحلیل دارو
HPLC می تواند برای تجزیه و تحلیل ترکیب دارو برای تعیین مواد فعال و ناخالصی های مضر داروها استفاده شود. به عنوان مثال ، از طریق تجزیه و تحلیل فلاونوئیدها ، آلکالوئیدها و سایر مواد فعال در مواد دارویی چینی ، می توان انواع و محتوای مواد فعال را برای اطمینان از کیفیت و اثربخشی داروها تعیین کرد. علاوه بر این ، HPLC همچنین می تواند برای تجزیه و تحلیل ترکیب دارو در اشکال دوز دارویی غربی مانند تزریق ، قرص ، کپسول و غیره مورد استفاده قرار گیرد تا اطمینان حاصل شود که ترکیب دارو در دارو با نیازهای مشخص شده مطابقت دارد.
HPLC نقش مهمی در تعیین غلظت دارو دارد. با تعیین دقیق میزان دارو در یک دارو ، می توان از ایمنی و اثربخشی دارو اطمینان حاصل کرد. به عنوان مثال ، در تجزیه و تحلیل داروهای آنتی بیوتیک ، می توان از HPLC برای تعیین میزان آنتی بیوتیک دارو برای ارزیابی اثر ضد باکتریایی دارو استفاده کرد. علاوه بر این ، HPLC همچنین می تواند برای تعیین غلظت داروها در ارگانیسم ها ، مانند پلاسما ، ادرار ، بافت و سایر نمونه های بیولوژیکی ، برای ارزیابی اثربخشی و عوارض جانبی داروها استفاده شود.
HPLC همچنین نقش مهمی در ارزیابی کیفیت دارو دارد. با مقایسه داده های تحلیلی دسته های مختلف داروها ، می توان ارزیابی کرد که آیا کیفیت داروها پایدار است یا خیر. علاوه بر این ، HPLC همچنین می تواند برای مطالعه اثربخشی و ویژگی های فارماکوکینتیک داروهای جدید ، تأمین علمی برای توسعه و بازاریابی داروهای جدید استفاده شود. به عنوان مثال ، در مرحله توسعه داروهای جدید ، جذب ، توزیع ، متابولیسم و دفع داروهای جدید در حیوانات می تواند توسط HPLC تعیین شود ، تا بتوانید اثربخشی و خصوصیات فارماکوکینتیک داروهای جدید را درک کنید و از آزمایشات بالینی و کاربردهای بازاریابی داروهای جدید پشتیبانی جدی کنید.
داروهای کایرال به مولکول های دارویی با مراکز کایرال اشاره می کنند ، و انانتیومرهای آنها ممکن است در فعالیت های داخل بدن ، متابولیسم و سمیت به طور قابل توجهی متفاوت باشد. بنابراین ، جداسازی و تعیین انانتیومرهای داروهای کایرال از اهمیت زیادی برخوردار است. این کروماتوگرافی نقش مهمی در تجزیه و تحلیل داروی کایرال ایفا می کند. با معرفی فاز ثابت کایرال یا افزودنی فاز موبایل کایرال ، انانتیومرهای داروی کایرال می توانند از هم جدا و به طور مؤثر تعیین شوند. به عنوان مثال ، برای داروهای اسید آمینه فعال نوری ، انانتیومرهای مختلف می توانند توسط این کروماتوگرافی برای ارزیابی فعالیت بیولوژیکی و سمیت دارو از هم جدا و تعیین شوند.
داروهای طبیعی از طیف گسترده ای از منابع با ترکیبات پیچیده تهیه می شوند و ممکن است حاوی انواع مختلفی از ترکیبات فعال زیستی باشد. کروماتوگرافی ستون نقش مهمی در تجزیه و تحلیل داروهای طبیعی دارد. با بهینه سازی شرایط کروماتوگرافی و انتخاب فاز موبایل مناسب ، جداسازی کارآمد و تعیین اجزای فعال در داروهای طبیعی قابل تحقق است. به عنوان مثال ، این روش کروماتوگرافی برای جدا کردن و تعیین مؤلفه های فعال داروهای گیاهی چینی مانند فلاونوئیدها و ساپونین ها برای درک انواع و محتوای آنها و ارائه پشتیبانی قوی از کنترل کیفیت ، توسعه و استفاده از داروهای گیاهی چینی استفاده شده است.
مزایا و چالش های کروماتوگرافی ستون HPLC در تجزیه و تحلیل دارو
روش کروماتوگرافی مزایای بازده جدایی بالا ، حساسیت بالا ، دامنه کاربرد گسترده و درجه بالایی از اتوماسیون در تجزیه و تحلیل دارو را دارد. با این حال ، در کاربرد عملی ، با چالش هایی نیز روبرو است. به عنوان مثال ، پیش درمانی نمونه برای اطمینان از خلوص و ثبات نمونه بسیار خواستار است. هزینه های تحلیلی بالا ، از جمله جمع آوری ابزار ، نگهداری ، کروماتوگرافی و مصرف فاز موبایل. علاوه بر این ، برای برخی از مؤلفه های دارای قطبیت قوی یا وزن مولکولی بزرگ ، HPLC ممکن است نتواند کاملاً از هم جدا یا تشخیص دهد. بنابراین ، در کاربردهای عملی ، مناسب ترین روش تجزیه و تحلیل باید با توجه به کیفیت کیفیت داروهای خاص و وضعیت واقعی انتخاب شود.
چشم انداز آینده
با پیشرفت علم و فناوری و توسعه فناوری کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا ، کاربرد آن در تجزیه و تحلیل دارو گسترده تر خواهد بود. از یک طرف ، توسعه مواد فاز ثابت جدید ، دامنه کاربرد کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا را تا حد زیادی گسترش می دهد و راندمان و انتخاب جداسازی را بهبود می بخشد. از طرف دیگر ، ابزارهای HPLC باهوش تر و خودکار تر خواهند بود و وضعیت ستون را در زمان واقعی از طریق سنسورهای یکپارچه نظارت می کنند ، امکان نگهداری پیش بینی ، کاهش خرابی و بهینه سازی فرآیندهای تجربی را فراهم می کنند. علاوه بر این ، همراه با فناوری تجزیه و تحلیل داده های بزرگ ، سیستم می تواند به طور خودکار پارامترهای عملیاتی را تنظیم کند تا با بهترین شرایط جداسازی نمونه های مختلف مطابقت داشته باشد و باعث بهبود کارایی و قابلیت اطمینان نتایج نتایج شود. این پیشرفت ها ابزارهای تحلیلی کارآمدتر ، دقیق تر و قابل اعتماد تر برای تجزیه و تحلیل دارو ، هدایت توسعه مواد مخدر و کنترل کیفیت را فراهم می کند.
به طور خلاصه ، این نوع کروماتوگرافی نقش مهمی در تجزیه و تحلیل دارو دارد و چشم انداز کاربرد گسترده ای دارد. با بهینه سازی مداوم شرایط کروماتوگرافی ، انتخاب مراحل مناسب برای موبایل و ثابت ، معرفی فن آوری ها و تجهیزات جدید تشخیص ، بهبود بیشتر دقت و قابلیت اطمینان آن در تجزیه و تحلیل دارو و ارائه پشتیبانی قدرتمندتر برای توسعه دارو ، کنترل کیفیت و استفاده از داروهای بالینی.
شایستگی ها و demerits
مزیت
جدایی کارآمد
کروماتوگرافی ستون HPLC از پمپ تزریق فشار بالا و فاز ثابت با راندمان بالا استفاده می کند ، که باعث می شود راندمان ستون بسیار بالاتر از کروماتوگرافی مایع کلاسیک باشد و می تواند از جداسازی کارآمد مخلوط های پیچیده استفاده کند.
حساسیت بالا
مجهز به آشکارسازهای حساسیت بالا ، مانند آشکارسازهای ماوراء بنفش ، آشکارسازهای فلورسانس و غیره ، می توانند غلظت کم نمونه ها را تشخیص دهند ، که به ویژه برای تجزیه و تحلیل ردیابی مهم است.
به طور گسترده استفاده می شود
این امر با نوسانات و پایداری حرارتی نمونه محدود نمی شود و می تواند ماده آلی را با نقطه جوش زیاد ، پایداری حرارتی ضعیف و توده مولکولی نسبی بزرگ تجزیه و تحلیل کند و طیف گسترده ای از کاربردهای آن را دارد.
انتخاب خوب
انواع مختلفی از فاز تلفن همراه وجود دارد و با تغییر نوع و ترکیب فاز موبایل برای برآورده کردن نیازهای تحلیلی نمونه های مختلف ، می توان انتخاب جدایی را بهبود بخشید.
درجه بالا اتوماسیون
بیشتر ابزارهای مدرن HPLC مجهز به نمونه گیری خودکار و پردازنده داده ها هستند که می توانند اتوماسیون تجزیه و تحلیل را تحقق بخشند و کارایی تجزیه و تحلیل را بهبود بخشند.
بازیابی نمونه آسان است
نمونه پس از عبور از ستون از بین نمی رود و می توان یک مؤلفه واحد را جمع آوری یا تهیه کرد ، که برای آزمایش ها یا برنامه های بعدی مناسب است.
کمبود
قیمت و هزینه های نگهداری روزانه کروماتوگرافی های مایع زیاد است ، از جمله تعویض ستون ، مصرف فاز متحرک و کالیبراسیون منظم ابزار.
اگرچه سریعتر از کروماتوگرافی مایع کلاسیک ، زمان تجزیه و تحلیل HPLC در مقایسه با کروماتوگرافی گازی ، به ویژه برای جداسازی و تجزیه و تحلیل نمونه های پیچیده ، نسبتاً طولانی است.
اگرچه ابزارهای HPLC بسیار خودکار هستند ، اما عملکرد و نگهداری ابزارها هنوز به سطح خاصی از تخصص و تجربه نیاز دارند. علاوه بر این ، پیش پردازش نمونه ها می تواند پیچیده باشد.
با توجه به جذب برگشت ناپذیر برخی از ترکیبات در مرحله ثابت ، این ترکیبات ممکن است به طور مؤثر تشخیص داده نشوند ، بنابراین بر صحت تجزیه و تحلیل تأثیر می گذارد.
جداسازی LC اغلب به شدت تحت تأثیر دمای ستون قرار می گیرد و برای به دست آوردن نتایج قابل تکرار ، باید شرایط دما ثابت حفظ شود ، که این باعث افزایش پیچیدگی و هزینه آزمایش می شود.
اقدامات احتیاطی در تعیین میزان دارو
 |
 |
 |
این روش اقدامات احتیاطی زیادی برای تعیین محتوای دارو دارد ، که برای اطمینان از صحت و قابلیت اطمینان نتایج تعیین بسیار مهم است. در اینجا برخی از ملاحظات کلیدی آورده شده است:
تفاوت ستون بر رفتار احتباس دارو تأثیر می گذارد ، حتی اگر طول ستون ، قطر داخلی ، اندازه ذرات همان ستون ، به دلیل خاصیت های مختلف پرکننده ، زمان احتباس و نوع اوج دارو ممکن است بسیار متفاوت باشد. بنابراین ، ستون مناسب باید با توجه به خواص دارو و نیازهای جدایی انتخاب شود.
برای جلوگیری از آلودگی و انسداد ، ستون باید به طور مرتب نگهداری شود تا از عملکرد خوب جداسازی آن اطمینان حاصل شود.
pH نمکی بافر فاز متحرک تأثیر قابل توجهی در رفتار احتباس داروها دارد و حتی ممکن است ترتیب اوج برخی از داروها را تغییر دهد. بنابراین ، هنگام بهینه سازی فاز موبایل ، باید به مقدار pH نمک بافر توجه ویژه ای داشته باشد.
ترکیب فاز متحرک نیز بر اثر جداسازی دارو تأثیر می گذارد. به عنوان مثال ، در تعیین آماده سازی مولتی ویتامین ، تغییر در نسبت نسبی سدیم هگزانسولفونات و سولفونات هپتون سدیم در فاز متحرک بر زمان احتباس و شکل اوج هر مؤلفه تأثیر می گذارد. بنابراین ، ترکیب فاز موبایل مناسب باید با توجه به ماهیت دارو و نیازهای تحلیلی انتخاب شود.
فرآیند انتقال نمونه باید از نمایندگی و ثبات نمونه برای جلوگیری از تخریب یا آلودگی نمونه در طول پردازش اطمینان حاصل کند.
هنگام وزن کردن نمونه ، باید از روش افزودنی استفاده شود تا در یک زمان آن را در یک زمان وزن کند تا از صحت وزنه برداری اطمینان حاصل شود. در عین حال ، عملکرد توزین باید استاندارد شود تا از نشت جلوگیری شود.
کیفیت ماده مرجع تأثیر مستقیمی در نتیجه تعیین محتوا دارد. بنابراین ، کیفیت محتوای قابل اعتماد و دقیق باید انتخاب شود.
محصولات کنترل باید مطابق نیاز برای جلوگیری از تخریب یا آلودگی ذخیره شوند. اگر محصول کنترل در یخچال نگه داشته شود ، قبل از وزن باید در فر خشک کردن گرم شود.
نوع آشکارساز مناسب باید با توجه به ماهیت دارو و نیازهای تحلیلی مانند ردیاب ماوراء بنفش ، ردیاب فلورسانس و غیره انتخاب شود.
ردیاب باید به صورت دوره ای کالیبره شود تا از صحت نتایج اندازه گیری آن اطمینان حاصل شود.
تجزیه و تحلیل آماری معقول از داده های اندازه گیری برای اطمینان از قابلیت اطمینان و تکرارپذیری نتایج. به عنوان مثال ، انحراف استاندارد نسبی (RSD) از منطقه اوج را می توان برای ارزیابی دقت نتایج اندازه گیری محاسبه کرد.
هنگام محاسبه محتوا ، باید از روشهای قابل اعتماد مانند استانداردهای خارجی یا داخلی استفاده شود و خطی بودن منحنی استاندارد باید تضمین شود.
هنگام ایجاد یک روش تعیین محتوای جدید ، تأیید روش شناختی باید انجام شود ، از جمله ویژگی ، خطی ، دامنه ، دقت ، دقت ، دوام و غیره.
تأیید روش شناختی وسیله ای مهم برای اطمینان از این است که روش اندازه گیری علمی ، معقول و قابل اعتماد است.
اطمینان حاصل کنید که ابزار در طی فرآیند تجزیه و تحلیل ، به ویژه هنگام انجام تجزیه و تحلیل چند پین پایدار است ، توجه کنید که آیا ارزش پاسخ و شکل اوج ابزار پایدار است.
اگر داده های غیر طبیعی در طی فرآیند تجزیه و تحلیل رخ دهد ، باید با دقت بررسی و حذف شود و در صورت لزوم دوباره تجزیه و تحلیل شود.
تگ های محبوب: کروماتوگرافی ستون HPLC ، تولید کنندگان کروماتوگرافی ستون HPLC چین ، تهیه کنندگان ، کارخانه
یک جفت
ستون کروماتوگرافی صنعتیارسال درخواست
شما نیز ممکن است دوست داشته باشید
